Bovint viral diarrévirus antikropp ELISA -kit

Specifikation

 

Testförfaranden och tolkning

 

Steg 1 Testprocedur

1.1 Tvättlösning

Workekoncentration wASHING -vätska:Före användning bör tvättlösningen återställas till rumstemperatur (20-25 examen) och skakas jämnt för att göra den enhetlig. Späd sedan ut 20 gånger den koncentrerade tvättlösningen med renat vatten (till exempel 5 ml koncentrerad tvättlösning tillsätts till 95 ml renat vatten), blandas väl, och den utspädda tvättvätskan kan förvaras vid 2-8 grad under 7 dagar.

1.2 Provförberedelser

① Hel djurblod togs, centrifugerades vid 4000 rpm under 10 minuter, och supernatanten uppsamlades. Serum kan också koaguleras naturligt utan hemolys.

② Späd serumprovet 1:50 (tillsätt 3ul serumprov till 147ul provutspädningsmedel) och blanda noggrant.

Obs: Negativa och positiva kontroller behöver också utspädas.

1.3 Enzymkonjugatberedning

Späd enzymkonjugatet 1: 250 (tillsätt 2ulenzymkonjugat (x100) till 498ul provutspädningsmedel) och blanda noggrant.

1.4 Testprocedur

① Ta upp enzymetikettmikroplattan (enligt antalet prover, kan demonteras och användas flera gånger), tillsätt 100ul av det utspädda serumet i enzymetikettmikroplattan, ställ in två brunnar vardera för negativa och positiva prover och tillsätt 100ul vardera för negativa respektive positiva kontroller till reaktionen väl. Skaka försiktigt provet i brunnen med hjälp av tätningsplattfilmen för att täcka plattan och inkubera vid 37 grader i 30 minuter.

② Öppna tätningsplattfilmen, skaka av lösningen i plattan, tillsätt 300 ul arbetskoncentrationstvättvätska till varje brunn och kassera sedan vätskan i brunnen. Upprepa ovanstående steg 5 gånger och klappa slutligen torrt på ett rent absorberande papper.

Lägg till 100 ul enzymkonjugat till varje brunn, täck plattan och inkubera vid 37 grader i 45 minuter.

④ Öppna tätningsplattfilmen, skaka av lösningen i plattan, tillsätt 300 ul arbetskoncentrationstvättvätska till varje brunn och kassera sedan vätskan i brunnen. Upprepa ovanstående steg 5 gånger och klappa slutligen torrt på ett rent absorberande papper.

Lägg till 100 ul substratlösning på varje brunn, täck plattan och inkubera i 10 minuter vid 37 grader bort från ljuset.

Lägg till 50 ul stopplösning på varje brunn och bestäm resultatet inom 5 minuter.

 

Steg 2 Resultat Tolkning

 

OD450 -värdet för varje brunn lästes på 96- brunnmikroplattläsaren.

2.1 Validering

Det genomsnittliga OD450Nm -värdet för negativ kontroll var<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Beräkningsmetod

För varje prov, beräkna S/P enligt följande med hjälp av de korrigerade prov- och kontrollvärdena:

2.3 Resultat Tolkning

När S/P<0.25, it is judged as negative.

När S/P större än eller lika med 0. 35 bedöms det som positivt.

När 0. 25 mindre än eller lika med s/p<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

Populära Taggar: Bovint viral diarrévirus Antikropp ELISA -kit, Kina Bovint viral diarrévirus Antikropp ELISA -kit leverantörer, tillverkare, fabrik