Brucella antikropp ELISA -kit

Specifikation

 

Testförfaranden och tolkning

 

Steg 1 Testprocedur

1.1 Tvättlösning

Workekoncentration wASHING -vätska:Före användning bör tvättlösningen återställas till rumstemperatur (20-25 examen) och skakas jämnt för att göra den enhetlig. Späd sedan ut 20 gånger den koncentrerade tvättlösningen med renat vatten (till exempel 5 ml koncentrerad tvättlösning tillsätts till 95 ml renat vatten), blandas väl, och den utspädda tvättvätskan kan förvaras vid 2-8 grad i 7 dagar.

1.2 Provberedning

① Hell djurblod togs, centrifugerades vid 4000 rpm under 10 minuter, och supernatanten uppsamlades. Serum kan också koaguleras naturligt utan hemolys.

② När provstorleken är stor för att säkerställa att experimentell reaktionstid är konsekvent. Blanda serumprovet med antikroppsarbetslösningen vid 1: 1 i utspädningsplattan (70ul serumprov + 70 ul -antikroppsarbetslösning). Den negativa kontrollen och positiva kontrollen är desamma som serumprovet.

1.3 Testprocedur

① Ta upp enzymetikettmikroplatten (enligt antalet prover, kan demonteras och användas flera gånger), ställa in två brunnar vardera för negativa och positiva kontroller, tillsätt 100ul av den förblandade blandningen till enzymetikettmikroplattan. Skaka försiktigt provet i brunnen med hjälp av tätningsplattfilmen för att täcka plattan och inkubera vid 37 grader i 30 minuter.

② Öppna tätningsplattfilmen, skaka av lösningen i plattan, tillsätt 300 ul arbetskoncentrationstvättvätska till varje brunn och kassera sedan vätskan i brunnen. Upprepa ovanstående steg 5 gånger och klappa slutligen torrt på ett rent absorberande papper.

③Denzymkonjugat:Späd enzymkonjugatet (50 x) 50 gånger (till exempel: 20ul enzymkonjugatkoncentrat + 980 ul -utspädningsmedel 1 beräknas den specifika mängden som krävs enligt antalet testprover), blanda väl och avsatt.

Lägg till 100 ul enzymkonjugat till varje brunn, täck plattan och inkubera vid 37 grader i 30 minuter.

⑤vättande enzymplatta, den specifika operationen är densamma som ovan ②.

Lägg till 100 ul substratlösning på varje brunn, täck plattan och inkubera i 10 minuter vid 37 grader bort från ljuset.

Lägg till 50 ul stopplösning på varje brunn och bestäm resultatet inom 5 minuter.

 

Steg 2 Resultat Tolkning

 

OD450 -värdet för varje brunn lästes på 96- brunnmikroplattläsaren.

2.1 Validering

 

Det genomsnittliga OD45 0 nm -värdet för positiv kontroll var <0,35 och det genomsnittliga OD450Nm -värdet för negativ kontroll/positiv kontroll var större än eller lika med 3,5, de experimentella resultaten var giltiga. Annars bör testet upprepas.

2.2 Beräkningsmetod

För varje prov, beräkna PI (blockering av ATE) enligt följande med hjälp av de korrigerade prov- och kontrollvärdena:

2.3 Resultat Tolkning

När PI <20%bedöms det som negativt.

När PI> 30%bedöms det som positivt.

När 20% mindre än eller lika med PI mindre än eller lika med 30%, bedöms det som misstänksam och föreslår att upprepa provtagning och testa en vecka senare.

Populära Taggar: Brucella antikropp ELISA -kit, China Brucella antikroppsleverantörer, tillverkare, tillverkare, fabrik